Identification et caractérisation de AdcA, un membre de la famille des arrestines présent chez l'amibe Dictyostelium discoideum. - Laboratoire des Interactions Plantes Microbes Environnement Accéder directement au contenu
Thèse Année : 2010

Identification and caracterization of AdcA, a member of arrestin familly, in social amoeba Dictyostelium discoideum

Identification et caractérisation de AdcA, un membre de la famille des arrestines présent chez l'amibe Dictyostelium discoideum.

Résumé

This work was dedicated to the study of the AdcA protein in Dictyostelium discoideum. AdcA has been dentified through its arrestin domain. Its arrestin core is extended on both sides by several domains among which a FYVE domain and a triplicated histidinerich domain. Subcellular localization studies of the endogenous protein or tagged AdcA forms coupled to the use of various endocytic markers showed that AdcA is present on early endosomes. The study of AdcA's different sub-domains has highlighted a role of the FYVE domain in this localization and a role of the histidine-rich domain in the metal-dependent oligomerization of the protein. My experimental work using an engineered adcA null strain suggests that AdcA could be involved in the recycling pathway going from early endosomes to the plasma membrane. By the use of the yeast two hybrid screen and pull down experiments, I have shown that AdcA is able to interact with the small G protein ArfA. This result fits with a role of AdcA on recycling vesicles where the protein could, in association with ArfA, sort membrane proteins for recycling.
Ce travail de thèse a été consacré à l'étude de la protéine AdcA de Dictyostelium discoideum. Cette protéine a été identifiée sur la base de la présence d'un domaine arrestine. Ce coeur arrestine est jouxté par plusieurs domaines dont un motif FYVE et un motif répété trois fois contenant des clusters d'histidines. L'étude de la localisation subcellulaire de AdcA endogène ou de formes étiquetées couplée à l'utilisation de marqueurs de différents compartiments de la voie endocytaire ont permis de mettre en évidence un enrichissement majeur de AdcA au niveau des endosomes précoces. L'étude des différents domaines d'AdcA a mis en lumière le rôle du domaine FYVE dans sa localisation endocytaire et l'implication du domaine N-terminal riche en histidines dans son oligomérisation métal-dépendante. Mes travaux utilisant le mutant adcA nul indique que AdcA pourrait jouer un rôle au niveau d'une voie de recyclage entre les endosomes précoces et la membrane plasmique. Nous avons également pu montrer par des expériences de double hybride et de pull-down que AdcA est capable d'interagir avec la petite protéine G ArfA. Ceci est en accord avec un rôle de AdcA au niveau du recyclage où elle pourrait permettre en association avec ArfA un tri de protéines membranaires dans des vésicules de recyclage.
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Dates et versions

tel-00926231 , version 1 (15-01-2014)

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  • HAL Id : tel-00926231 , version 1

Citer

Dorian Guetta. Identification et caractérisation de AdcA, un membre de la famille des arrestines présent chez l'amibe Dictyostelium discoideum.. Organisation et fonctions cellulaires [q-bio.SC]. Université de Grenoble, 2010. Français. ⟨NNT : ⟩. ⟨tel-00926231⟩
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