ASP, la protéine AntiSens du VIH-1 : étude de ses transcrits et de la réponse anticorps anti-ASP chez le patient - CNRS - Centre national de la recherche scientifique Accéder directement au contenu
Thèse Année : 2019

ASP, the Antisense Protein of HIV-1 : study of its transcripts and of the antibody response targeting ASP in patients

ASP, la protéine AntiSens du VIH-1 : étude de ses transcrits et de la réponse anticorps anti-ASP chez le patient

Résumé

HIV-1 presents a gene encoding for a protein named ASP (AntiSense Protein) on the antisense strand of its proviral genome. The gene encoding ASP is uniquely conserved within the M group of HIV-1 responsible for the pandemic, wich strongly suggests the implication of ASP and its transcripts in HIV-1 virulence or spreading. Several studies reported the expression of HIV-1 antisense transcripts and of ASP protein in cells infected in vitro and ex vivo. Despite these progress however, the expression of ASP in patients remains a subject of debate, and limited information is available on its potential function. To support the in vivo expression of ASP and its transcripts, and to improve our understanding of its expression in patients, I studied asp transcripts and the antibody response anti-ASP in biologic samples from HIV-1 infected patients. I developed a technic based on the immuno-precipitation of a nanoluciferase-ASP fusion protein to detect anti-ASP antibodies, and a strand-specific RT-qPCR to detect asp transcripts. Using both technics, I detected asp transcrits in the cells isolated from 2 patients, and the presence of anti-ASP antibodies in the plasma of 4 patients. In these 4 patients, the anti-ASP antibody response fluctuates overtime and targets one or several conserved epitopes of ASP. Overall, my results demonstrate that the asp gene is expressed during HIV-1 infection and confirm the immunogenicity of different domains of ASP. Even though the study of a small number of patients does not allow assessing the eventual protection conferred by the anti-ASP antibody response, the comprehension of the immuno-virological parameters underlying its fluctuations in patients could have interesting therapeutic implications.
Le VIH-1 possède sur le brin antisens de son génome proviral un gène codant pour une protéine nommée ASP (Antisense Protein). Le gène codant pour ASP est uniquement conservé dans le groupe M du VIH-1 responsable de la pandémie, ce qui suggère fortement l’implication d’ASP et de ses transcrits dans la virulence ou la propagation du VIH-1. Plusieurs études ont rapporté l’expression de transcrits antisens du VIH-1 et de la protéine ASP dans des cellules infectées in vitro et ex vivo. Cependant, malgré ces avancées, l’expression d’ASP chez le patient reste contestée, et les informations concernant sa fonction potentielle sont limitées. Afin d’appuyer l’existence d’ASP et de ses transcrits in vivo et d’améliorer notre compréhension de leur expression chez le patient, j’ai étudié les transcrits d’asp et la réponse anticorps anti-ASP dans des échantillons biologiques de patients infectés par le VIH-1. J’ai développé une technique basée sur l’immuno-précipitation de la protéine de fusion nanoluciférase-ASP pour détecter les anticorps anti-ASP, ainsi qu’une technique de RT-qPCR brin-spécifique pour détecter les transcrits d’asp. A l’aide de ces deux techniques, j’ai détecté la présence de transcrits d’asp dans les cellules isolées de 2 patients, et la présence d’anticorps anti-ASP dans le plasma de 4 patients. Chez ces 4 patients, la réponse anticorps anti-ASP fluctue au cours du temps et cible un ou plusieurs épitopes conservés d’ASP. Dans l’ensemble, mes résultats démontrent que le gène asp est exprimé au cours de l’infection par le VIH-1, et confirment l’immunogénicité de différents domaines de la protéine ASP. Bien que l’étude d’un petit nombre de patients ne permette pas d’analyser la protection éventuellement conférée par la réponse anticorps anti-ASP, la compréhension des paramètres immuno-virologiques qui gouvernent les fluctuations de cette réponse anticorps chez le patient pourrait avoir d’intéressantes retombées thérapeutiques.

Domaines

Virologie
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Citer

Juliette Savoret. ASP, la protéine AntiSens du VIH-1 : étude de ses transcrits et de la réponse anticorps anti-ASP chez le patient. Virologie. Université Montpellier, 2019. Français. ⟨NNT : 2019MONTT050⟩. ⟨tel-03035392⟩
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